一種可提高睪酮的收率及大幅減少雜質(zhì)的合成睪酮方法 技術領域 [0001] 本發(fā)明涉及一種以4-雄烯二酮一步法合成睪酮的方法。 背景技術 [0002] 睪酮(Testosterone)是用于無睪癥的替代治療、男性更年期綜合癥、陽痿等病的治療藥物。也有增強性欲、力量、免疫功能、對抗骨質(zhì)疏松癥等功效。 [0003] 據(jù)文獻報道，睪酮的合成是采用雙烯醇酮醋酸酯為原料，經(jīng)肟化、貝氏反應、水解、沃氏氧化得到4-雄烯二酮，再通過還原和選擇性氧化得到。從4-雄烯二酮計，收率為 70.8％。該工藝反應步驟多，更由于氧化劑活性二氧化錳的氧化活性不穩(wěn)定及選擇性氧化的終點較難控制，使的副反應增加，總收率不高。鄭士輝等以4-雄烯二酮為原料，選擇性還原，一步合成睪酮，再較優(yōu)條件下，收率88.4％(w/w)，雜質(zhì)3，17-二醇物的含量最低也要達到2.6％(w/w)，給后處理帶來了很大困難。王學華等采用微生物轉化法將4-雄烯二酮合成睪酮，底物濃度只有0.7mg/ml。 [0004] 本發(fā)明以植物甾醇通過發(fā)酵制得的4-雄烯二酮為原料，采用一步法合成睪酮，收率達93％(w/w).本發(fā)明具有工藝簡單，反應選擇性高，產(chǎn)品收率高，后處理簡單，成本低，市場競爭明顯等特點。 [0005] 鄭士輝，方麗等以10g雄烯二酮溶解于不同溶劑體系中，加入0.1g催化劑，慢慢加入1g硼氫化鉀或硼氫化鈉，-5℃至-10℃反應至雄烯二酮基本完全加入1mL的冰乙酸，待氣泡消失后，減壓蒸餾后水析得粗品，乙醇重結晶得睪丸素精品。收率88.4％(w/w)，雜質(zhì)3， 17-二醇物的含量最低也要達到2.6％(w/w)。 [0006] 陳小明，黎金旭，王洪鐘，孟慶雄等以微生物轉化法生產(chǎn)睪酮，采用亞硝基胍(NTG)對主產(chǎn)雄甾一4一烯一3，17一二酮(AD)的菌株YHT-1進行誘變，獲得了一株睪酮(Ts)產(chǎn)量較高的菌株YH0103。通過對發(fā)酵條件及發(fā)酵培養(yǎng) [0007] 基的優(yōu)化，獲得最佳轉化培養(yǎng)基：葡萄糖15g·L，硝酸銨4g·L，MgSO4?0.5g·L-1，K2HPO4?0.5g·L，植物甾醇2g·L，Tween80?6g·L。，pH值6.5；種子培養(yǎng)時間30h，接種量 10％，培養(yǎng)溫度28℃。在最佳轉化條件下，TS轉化率最高為46.20％(w/w)。 [0008] 中國醫(yī)藥工業(yè)工藝匯編介紹的工藝，采用雙烯醇酮醋酸酯為原料，經(jīng)肟化、貝氏反應、水解、沃氏氧化得到4-雄烯二酮，再通過還原和選擇性氧化得到。從4-雄烯二酮計，收率為70.8％(w/w)。該工藝反應步驟多，更由于氧化劑活性二氧化錳的氧化活性不穩(wěn)定及選擇性氧化的終點較難控制，使的副反應增加，總收率不高。 [0009] 從現(xiàn)有技術來看，睪酮的合成收率及雜質(zhì)的控制還有待優(yōu)化。 發(fā)明內(nèi)容 [0010] 本發(fā)明要解決的技術問題是提供一種可提高睪酮的收率及大幅減少雜質(zhì)的合成睪酮方法。 [0011] 為了解決上述技術問題，本發(fā)明提供的合成睪酮方法，通過將雄烯二酮溶解在混合溶劑中，還原劑硼氫化鉀溶解在水中，降低還原劑的濃度和還原反應的速度，提高睪酮的選擇性，減少了雜質(zhì)的生成，高收率的得到了睪酮。 [0012] 具體地，本發(fā)明的合成睪酮方法，包括如下步驟： [0013] 步驟1，將雄烯二酮溶解于5-15倍(重量比)的混合溶劑體系中，冷卻到-10℃以下； [0014] 步驟2，將硼氫化鉀溶解在8-15倍(重量比)的純水中； [0015] 步驟3，將步驟2配置的溶液加到5-15倍(重量比)步驟1獲得的、-5℃至-10℃的料液中；具體是將配置的溶液用蠕動泵按0.1-0.5ml/min加到步驟1獲得的料液中； [0016] 步驟4，加畢，在-5℃至-10℃條件下反應至雄烯二酮反應完全(采用HPLC跟蹤)，加入重量為所述硼氫化鉀的15-40％的冰乙酸，以破壞過量的硼氫化鉀，然后減壓回收溶劑，加水(重量為雄烯二酮的10-20倍)，過濾，固體真空干燥得粗品； [0017] 步驟5，粗品經(jīng)乙醇重結晶得睪酮精品，優(yōu)選采用粗品的8-15倍(重量比)的乙醇。 [0018] 本發(fā)明的具有以下優(yōu)點： [0019] 1、本發(fā)明通過將雄烯二酮溶解在混合溶劑中，還原劑硼氫化鉀溶解在水中，降低還原劑的濃度和還原反應的速度，提高睪酮的選擇性，高收率的得到了睪酮； [0020] 2、本發(fā)明降低了還原劑的濃度。雄烯二酮在還原過程中，3位和17位的酮基多可以被還原，所以降低還原劑的濃度，并用蠕動泵將還原劑的水溶液均勻的加到反應體系中，這樣大大提高了反應的選擇性，睪酮收率達到了93％(w/w)以上?，F(xiàn)有技術中最高收率88.4(w/w)％；