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一種新的胃癌標(biāo)志物circ-EIF4G3的應(yīng)用

專利號(hào)
CN109988845B
公開日期
2019-10-25
申請(qǐng)人
江蘇萬成生物醫(yī)學(xué)研究院有限公司(江蘇省南京市江寧區(qū)清水亭東路998號(hào)吉印嘉禾11棟)
發(fā)明人
康寧; 朱桂芳; 曹秀峰
IPC分類
C12N15/11
技術(shù)領(lǐng)域
eif4g3,circ,胃癌,rna,標(biāo)志物,pcr,seq,組織,標(biāo)志,樣本
地域: 江蘇省 江蘇省南京市

摘要

本發(fā)明公開了一種新的胃癌標(biāo)志物circ?EIF4G3的應(yīng)用,涉及circ?EIF4G3分子標(biāo)志物的檢測、應(yīng)用,設(shè)計(jì)并合成出特異性用于實(shí)時(shí)定量PCR的檢測引物。針對(duì)目標(biāo)人群對(duì)胃癌內(nèi)鏡篩查依從性差,以及臨床上確診的胃癌患者絕大多數(shù)都是中晚期的現(xiàn)狀提出,在胃癌癌變進(jìn)程中找到理想的分子預(yù)警信號(hào),有針對(duì)性的進(jìn)行內(nèi)鏡檢查,病理確診,以減輕病人痛苦,避免過度醫(yī)療,節(jié)省醫(yī)療資源。本發(fā)明發(fā)現(xiàn)circ?EIF4G3分子標(biāo)志物可作為胃癌患者檢測和監(jiān)測預(yù)后的標(biāo)志物。

說明書

1 2 3 4 5
一種新的胃癌標(biāo)志物circ-EIF4G3的應(yīng)用 技術(shù)領(lǐng)域 [0001] 本發(fā)明涉及腫瘤分子生物學(xué)領(lǐng)域,具體為一種新的胃癌標(biāo)志物circ-EIF4G3的應(yīng)用。 背景技術(shù) [0002] 目前,胃癌仍然在全球癌癥相關(guān)死亡排名第三位,是社會(huì)的主要健康負(fù)擔(dān)之一。在中國,胃癌是第二大流行癌癥,也是導(dǎo)致癌癥死亡的第二大原因,2015年估計(jì)有679,100新病例和498,000人死亡。雖然手術(shù)技術(shù)和聯(lián)合化療方案有所進(jìn)步,但在大多數(shù)國家,胃癌的5年總生存仍低于30%,因?yàn)槿狈ξ赴┰缙谠\斷標(biāo)志物。因此,有必要仔細(xì)探索胃癌相關(guān)分子特征,并開發(fā)出合理的胃癌早期檢測方法。 [0003] 環(huán)狀RNA(circRNA)被認(rèn)為是由線性前體mRNA的非經(jīng)典剪接產(chǎn)生的,在病毒樣感染性顆粒如類病毒、圓形衛(wèi)星病毒及丁型肝炎病毒被廣泛發(fā)現(xiàn)。環(huán)狀RNAs似乎是錯(cuò)誤的RNA剪接的結(jié)果,一直沒發(fā)現(xiàn)它的關(guān)鍵作用和功能,直到最近才發(fā)現(xiàn)并且已經(jīng)永久地改變了我們對(duì)癌癥的觀點(diǎn),特別是癌變和癌癥進(jìn)展。迄今為止,在哺乳動(dòng)物細(xì)胞中已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了一些內(nèi)源性的circRNA,并且它們?cè)谀[瘤進(jìn)展中可以高豐度存在以及進(jìn)化保守性。另外,已經(jīng)有大量研究證實(shí)環(huán)狀RNA可能調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄及操控microRNA的通路。有幾種circRNA被認(rèn)為是造成癌細(xì)胞惡性生物學(xué)行為的原因。然而,由于我們對(duì)于circRNA的理解是有限的,許多可以作為microRNA起作用的circRNA可能還沒有被發(fā)現(xiàn)。越來越多的證據(jù)表明,circRNA可能在包括胃癌在內(nèi)的癌癥的發(fā)生和發(fā)展中起重要作用,并且可能成為癌癥的新生標(biāo)志物。Zhang?J的團(tuán)隊(duì)發(fā)現(xiàn)circLARP4在胃癌組織中下調(diào),并且通過擴(kuò)增miR-424靶向作用于LATS1基因,抑制胃癌細(xì)胞的生物學(xué)行為,這是胃癌患者總生存的獨(dú)立預(yù)后因素。 [0004] 目前,現(xiàn)有技術(shù)中,通通過檢測患者血液中CEA/CA199/CA153等腫瘤指標(biāo)來評(píng)估患者的病情,這些指標(biāo)特異性和靈敏性均較差。 發(fā)明內(nèi)容 [0005] 為解決上述問題,本發(fā)明公開了一種新的胃癌標(biāo)志物circ-EIF4G3的應(yīng)用,針對(duì)目標(biāo)人群對(duì)胃癌內(nèi)鏡篩查依從性差,以及臨床上確診的胃癌患者絕大多數(shù)都是中晚期的現(xiàn)狀提出,在胃癌癌變進(jìn)程中找到理想的分子預(yù)警信號(hào),有針對(duì)性的進(jìn)行內(nèi)鏡檢查,病理確診,以減輕病人痛苦,避免過度醫(yī)療,節(jié)省醫(yī)療資源。本發(fā)明發(fā)現(xiàn)血circ-EIF4G3可作為胃癌患者淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和監(jiān)測預(yù)后的標(biāo)志物。 [0006] 為了達(dá)到以上目的,本發(fā)明供如下技術(shù)方案: [0007] 本發(fā)明公開了一種circ-EIF4G3標(biāo)志物在制備胃癌診斷試劑中的應(yīng)用,所述circ-EIF4G3標(biāo)志物的核苷酸序列為SEQ?ID?NO.1。 [0008] 在本發(fā)明中,用于胃癌診斷試劑為實(shí)時(shí)定量PCR試劑。 [0009] 一種胃癌診斷試劑,包括檢測circ-EIF4G3標(biāo)志物的試劑,所述試劑包括檢測circ-EIF4G3標(biāo)志物的引物和/探針。 [0010] 在本發(fā)明中,根據(jù)核苷酸序列為SEQ?ID?NO.1的circ-EIF4G3設(shè)計(jì)了1對(duì)引物用于檢測該序列,引物核苷酸序列為SEQ?ID?NO.4、SEQ?ID?NO.5所示。 [0011] 使用GAPDH作為內(nèi)部對(duì)照,GAPDH(F),5'-GCATCCTGGGCTACACTG-3',核苷酸序列為SEQ?ID?NO.2;GAPDH(R),5'-ACTTCAGGAGCATCTGAAATAGGT-3',核苷酸序列為SEQ?ID?NO.3。 [0012] 使用引物對(duì),上游引物:5′-CCTACCCCATCCCCTTATTC-3′,核苷酸序列為SEQ?ID?NO.4。下游引物,5′-ACCGTGCTGTAGACTGCTGAG-3’,核苷酸序列為SEQ?ID?NO.5。

權(quán)利要求

1.一種檢測血液中circ-EIF4G3標(biāo)志物表達(dá)水平的試劑在制備胃癌診斷試劑中的應(yīng)用,所述circ-EIF4G3標(biāo)志物的核苷酸序列為SEQ?ID?NO.1。
2.如權(quán)利要求1所述的檢測血液中circ-EIF4G3標(biāo)志物表達(dá)水平的試劑在制備胃癌診斷試劑中的應(yīng)用,其特征在于:所述檢測血液中circ-EIF4G3標(biāo)志物表達(dá)水平的試劑為實(shí)時(shí)定量PCR試劑。
3.如權(quán)利要求1或2所述的檢測血液中circ-EIF4G3標(biāo)志物表達(dá)水平的試劑在制備胃癌診斷試劑中的應(yīng)用,其特征在于:所述檢測血液中circ-EIF4G3標(biāo)志物表達(dá)水平的試劑包括
1對(duì)用于檢測SEQ?ID?NO.1?的引物,所述引物的核苷酸序列為SEQ?ID?NO.4、SEQ?ID?NO.5所示。
4.如權(quán)利要求1所述的檢測血液中circ-EIF4G3標(biāo)志物表達(dá)水平的試劑在制備胃癌診斷試劑中的應(yīng)用,其特征在于:所述檢測血液中circ-EIF4G3標(biāo)志物表達(dá)水平的試劑包括檢測circ-EIF4G3標(biāo)志物的引物和/或探針。
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