白丝美女被狂躁免费视频网站,500av导航大全精品,yw.193.cnc爆乳尤物未满,97se亚洲综合色区,аⅴ天堂中文在线网官网

蛋白組合物及其制備方法和用途

專(zhuān)利號(hào)
CN115778845B
公開(kāi)日期
2023-04-25
申請(qǐng)人
荷本世新(北京)生物科技有限公司; 安徽荷本生物科技有限公司(北京市大興區(qū)科苑路13號(hào)院1號(hào)樓4層402室)
發(fā)明人
張偉; 袁菊懋; 徐國(guó)金
IPC分類(lèi)
A61K8/73; A61K8/65; A61K8/64; A61Q19/08; A61Q19/00
技術(shù)領(lǐng)域
殼多糖,膠原,蛋白,多糖,膠原蛋白,乙酰,氨酸,溶液,衍生物,衍生
地域: 北京市 北京市大興區(qū)

摘要

本發(fā)明涉及一種蛋白組合物及其制備方法和用途。該組合物包括脫乙酰殼多糖衍生物和蛋白,所述脫乙酰殼多糖衍生物包括:(1)脫乙酰殼多糖主鏈;(2)與所述主鏈通過(guò)醚鍵連接的基團(tuán)A;以及(3)與所述主鏈通過(guò)酰胺鍵連接的基團(tuán)B,其中,所述基團(tuán)A具有一個(gè)或多個(gè)羥乙基,所述基團(tuán)B具有一個(gè)或多個(gè)?;鸵粋€(gè)或多個(gè)氨基。本發(fā)明提供的蛋白組合物能較好地經(jīng)皮滲透,在護(hù)膚品領(lǐng)域具有廣闊應(yīng)用前景。

說(shuō)明書(shū)

1 2 3 4 5 6
[0035] 在本發(fā)明的一些實(shí)施方式中,步驟(a)中,所述脫乙酰殼多糖的平均分子量為537? 18000Da在一些實(shí)施例中,所述脫乙酰殼多糖的平均分子量可以為550Da、600Da、650Da、 800Da、900Da、1000Da、1200Da、1500Da、2000Da、2500Da、3000Da、3500Da、4000Da、4500Da、 5000Da、6000Da、8000Da、9000Da、10000Da或其中任意二個(gè)數(shù)值之間的范圍,例如1000? 10000Da,1000?5000Da,或1000?3000Da。 [0036] 在本發(fā)明的一些實(shí)施方式中,步驟(a)中使用的脫乙酰殼多糖通過(guò)包括如下步驟的制備方法獲得:a1、將甲殼素水解,得到脫乙?;a(chǎn)物;a2、將所述脫乙酰化產(chǎn)物進(jìn)行氧化降解,得到所述脫乙酰殼多糖。 [0037] 在本發(fā)明的一些實(shí)施方式中,步驟a1中,水解條件包括將甲殼素溶解于酸性溶液,然后加堿例如(氫氧化鈉溶液)調(diào)節(jié)到堿性(例如pH至8?10)。酸性溶液可以是鹽酸或醋酸溶液,pH優(yōu)選在0?4之間。 [0038] 在本發(fā)明的一些實(shí)施方式中,步驟a1中,所述甲殼素與酸性溶液的固液比為1:5? 100。 [0039] 在本發(fā)明的一些實(shí)施方式中,所述脫乙酰殼多糖的制備包括:將甲殼素溶于酸性溶液(鹽酸、醋酸)中,溶液pH在0?4之間,所述甲克素與酸性溶液的固液比為1:5?100;上述甲殼素的酸性溶液中加入氫氧化鈉溶液(20?60%),調(diào)節(jié)pH至8?10,得沉淀1;將所得沉淀1,通過(guò)壓濾、水洗等步驟獲得沉淀2;將所得白色沉淀2加入反應(yīng)釜中,加入氫氧化鈉溶液,調(diào)節(jié)pH至8?9;再加入過(guò)氧化氫溶液;調(diào)節(jié)溫度至0?95℃,反應(yīng)0.5?24小時(shí),得懸浮液;將懸浮液通過(guò)離心,水洗,離心等步驟得沉淀3。 [0040] 在本發(fā)明的一些實(shí)施方式中,所述脫乙酰殼多糖衍生物的制備包括:將脫乙酰殼多糖溶于水中,調(diào)節(jié)pH8?10;向其中加入甲氧基聚乙二醇環(huán)氧乙烷,調(diào)節(jié)反應(yīng)溫度至0?95℃,反應(yīng)0.5?24小時(shí),得透明液體;使用酸性溶液調(diào)節(jié)透明液體的pH至2?4后,透析后(MW? 3000Da),經(jīng)冷凍干燥后得產(chǎn)物1;所述脫乙酰殼多糖與甲氧基聚乙二醇環(huán)氧乙烷的摩爾比為1:0.1?1; [0041] 將氨基酸或者多肽溶于pH為2?6的PBS溶液(0.05M?1M)中,向其中加入EDC,NHS,0? 4℃活化0.1?4h,再向其中加入產(chǎn)物1,控制溫度反應(yīng)0?24h;反應(yīng)完成透析后(MW?3000Da),經(jīng)冷凍干燥后得產(chǎn)物2;其中氨基或者多肽與EDC和NHS的摩爾比為1:1 1.5。 ~ [0042] 本發(fā)明的實(shí)施方式中,脫乙酰殼多糖衍生物通過(guò)在殼多糖表面修飾羥乙基,從而增加其與皮膚角質(zhì)層中脂質(zhì)的相容性;通過(guò)在氨基上修飾氨基酸(如:精氨酸、組氨酸)增加其正電荷量,從而提高其電荷含量。 [0043] 在第二方面,本發(fā)明提供了如上所述的蛋白組合物的制備方法,其包括如下步驟: 將脫乙酰殼多糖衍生物溶于溶劑,得到溶液A;將蛋白溶于溶劑得到溶液B;將溶液A和溶液B進(jìn)行混合。 [0044] 根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方式,所述溶劑為水。 [0045] 根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方式,所述溶液A中脫乙酰殼多糖衍生物的質(zhì)量濃度0.001%? 50%,例如0.001%、0.01%、0.05%、0.1%、0.2%、0.5%、1.0%、2%、5%、8%、10%、15%、20%、25%、30%、 35%、40%或45%。 [0046] 根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方式,所述溶液B中蛋白的質(zhì)量濃度為0.001%?50%,0.001%、 0.01%、0.05%、0.1%、0.2%、0.5%、1.0%、2%、5%、8%、10%、15%、20%、25%、30%、35%、40%或45%。 [0047] 根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方式,所述混合的條件包括:攪拌速度為10?2000?rpm,攪拌時(shí)間為0.1?48h。 [0048] 在第三方面,本發(fā)明還提供了一種護(hù)膚品,包括本發(fā)明第一方面所述的蛋白組合物。所述護(hù)膚品可以是水、乳、霜等。 [0049] 本發(fā)明提供的蛋白組合物可以有效地促進(jìn)蛋白的透皮吸收,在護(hù)膚品領(lǐng)域具有廣闊的應(yīng)用前景。 附圖說(shuō)明 [0050] 圖1是實(shí)施例1制備的脫乙酰殼多糖衍生物的氫譜。 [0051] 圖2是實(shí)施例1制備的羥乙基脫乙酰殼多糖的氫譜。 [0052] 圖3是實(shí)施例1制備的脫乙酰殼多糖CS、羥乙基脫乙酰殼多糖QYJ?CS、脫乙酰殼多糖衍生物JAS?CS的紅外譜圖。 [0053] 圖4是應(yīng)用例1樣品動(dòng)物皮膚試驗(yàn)的熒光成像圖。 [0054] 圖5是圖4熒光成像結(jié)果的統(tǒng)計(jì)圖。 [0055] 圖6是應(yīng)用例2樣品動(dòng)物皮膚試驗(yàn)的熒光成像圖。 [0056] 圖7是圖6的熒光成像結(jié)果的統(tǒng)計(jì)圖。 具體實(shí)施方式

權(quán)利要求

1.一種蛋白組合物,包括脫乙酰殼多糖衍生物和蛋白,
所述脫乙酰殼多糖衍生物包括:(1)脫乙酰殼多糖主鏈;(2)與所述主鏈通過(guò)醚鍵連接的基團(tuán)A;以及(3)與所述主鏈通過(guò)酰胺鍵連接的基團(tuán)B,其中,所述基團(tuán)A具有一個(gè)或多個(gè)羥乙基,所述基團(tuán)B具有一個(gè)或多個(gè)?;鸵粋€(gè)或多個(gè)氨基;
所述脫乙酰殼多糖衍生物具有如下結(jié)構(gòu)單元1、2中的至少一種:
其中,結(jié)構(gòu)單元1、2中,A表示所述基團(tuán)A,
B表示所述基團(tuán)B;
所述基團(tuán)A具有如下結(jié)構(gòu):
,m為1?100;
所述基團(tuán)B是 ;
所述脫乙酰殼多糖衍生物和蛋白分子的重量比為1:0.01?10;
所述脫乙酰殼多糖衍生物和所述蛋白形成納米顆粒;
所述蛋白選自纖連蛋白、重組Ⅲ型人源化膠原蛋白中的一種或多種;
所述脫乙酰殼多糖衍生物的平均分子量為500?18000Da。
2.權(quán)利要求1所述的蛋白組合物的制備方法,包括如下步驟:
將脫乙酰殼多糖衍生物溶于溶劑,得到溶液A;
將蛋白溶于溶劑得到溶液B;
將溶液A和溶液B進(jìn)行混合。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的制備方法,其特征在于,
所述溶劑為水;
所述溶液A中脫乙酰殼多糖衍生物的質(zhì)量濃度0.001%?50%;
所述溶液B中蛋白的質(zhì)量濃度為0.001%?50%;
所述混合的條件包括:攪拌速度為10?2000?rpm,攪拌時(shí)間為0.1?48h。
4.一種護(hù)膚品,包括權(quán)利要求1所述的蛋白組合物。
微信群二維碼
意見(jiàn)反饋