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一種西番蓮PeHSF1基因在負(fù)調(diào)控西番蓮抗旱和耐鹽性的應(yīng)用

專利號(hào)
CN119320784B
公開日期
2025-02-28
申請(qǐng)人
中國(guó)熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)院三亞研究院; 中國(guó)熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)院熱帶作物品種資源研究所(海南省三亞市崖州區(qū)創(chuàng)意產(chǎn)業(yè)標(biāo)準(zhǔn)廠房二期三樓235區(qū))
發(fā)明人
許奕; 宋順; 邢文婷; 黃東梅; 馬伏寧; 吳斌; 楊雙鈺; 李洪立; 胡文斌
IPC分類
C12N15/29; C07K14/415; C12N15/82; C12N15/81; C12N1/19; A01H5/00; A01H6/20; C12N15/11; C12R1/865
技術(shù)領(lǐng)域
西番蓮,基因,脅迫,轉(zhuǎn)基因,干旱,載體,酵母,方面,培養(yǎng),pcr
地域: 海南省 海南省三亞市

摘要

本發(fā)明提供了一種西番蓮PeHSF1基因,其核苷酸序列如SEQ?ID?NO:1所示。本發(fā)明提供了首次從西番蓮中克隆獲得西番蓮PeHSF1基因,研究顯示該基因還能夠明顯降低酵母在干旱脅迫和高鹽脅迫下的生存能力,在抗干旱脅迫和高鹽脅迫下,轉(zhuǎn)PeHSF1基因植物發(fā)芽率顯著降低,說明PeHSF1基因能夠明顯降低植物抗干旱脅迫和高鹽脅迫的能力,而且能夠抑制植物生長(zhǎng),使植物生長(zhǎng)緩慢等。本發(fā)明為研究酵母和植物抗逆性、調(diào)控植物生長(zhǎng)等方面的研究提供新的候選基因。

說明書

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一種西番蓮PeHSF1基因在負(fù)調(diào)控西番蓮抗旱和耐鹽性的應(yīng)用 技術(shù)領(lǐng)域 [0001] 本發(fā)明屬于生物領(lǐng)域,具體涉及一種西番蓮PeHSF1基因在負(fù)調(diào)控西番蓮抗旱和耐鹽性的應(yīng)用。 背景技術(shù) [0002] 西番蓮是一種多年生常綠攀緣木本藤蔓植物,是一種芳香可口的水果,被譽(yù)為“果汁之王”。又稱百香果、巴西果、藤桃、心蓮、西菊、枝蓮、酸茄花、鐘表草。它的天然原汁色澤艷麗,具有獨(dú)特濃郁的芳香風(fēng)味和豐富的營(yíng)養(yǎng)。西番蓮果實(shí)不僅營(yíng)養(yǎng)價(jià)值高,還有防病健身的功效。據(jù)測(cè)定,西番蓮汁含有60多種揮發(fā)性化合物,可溶性固物含量高達(dá)10?14%,有機(jī)酸、氨基酸種維生素和礦物質(zhì)元素含量均十分豐富,它作原料,可加工成果汁、果露、果醬、果凍等產(chǎn)品,具有美容養(yǎng)顏、清暑開胃、消除疲勞、提神醒酒、消炎祛斑、降脂降壓、防止動(dòng)脈硬化等功效。由于西番蓮的應(yīng)用越來越廣泛,其分子生物學(xué)的研究也不斷深入和發(fā)展,基因表達(dá)分析也逐漸應(yīng)用于揭示西番蓮基因表達(dá)和調(diào)控的機(jī)理。因此,對(duì)西番蓮中重要性狀基因定位、克隆、功能等,對(duì)于西番蓮的綜合開發(fā)利用具有重要的意義,對(duì)于西番蓮非生物脅迫抗性提高以及植株發(fā)育調(diào)控功能的研究具有積極的促進(jìn)作用。 發(fā)明內(nèi)容 [0003] 本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)中的不足,提供一種西番蓮PeHSF1基因在負(fù)調(diào)控西番蓮抗旱和耐鹽性的應(yīng)用。 [0004] 本發(fā)明的第一個(gè)方面是提供一種西番蓮PeHSF1基因,其核苷酸序列如SEQ?ID?NO: 1所示。 [0005] 本發(fā)明的第二個(gè)方面是提供本發(fā)明第一個(gè)方面所述西番蓮PeHSF1基因編碼的蛋白質(zhì)。 [0006] 本發(fā)明的第三個(gè)方面是提供含有本發(fā)明第一個(gè)方面所述西番蓮PeHSF1基因編碼區(qū)的重組載體。 [0007] 其中,所述重組載體原始載體可以采用基因重組領(lǐng)域中常用的載體,例如病毒、質(zhì)粒等。本發(fā)明對(duì)此不進(jìn)行限定。在本發(fā)明的一個(gè)具體實(shí)施方式中,所述原始載體采pMD?19?T載體、pCAMBIA1304表達(dá)載體和pYES?2表達(dá)載體,但應(yīng)當(dāng)理解的是,本發(fā)明還可以采用其他質(zhì)粒、或者病毒等。 [0008] 優(yōu)選地,所述重組載體的原始載體為pCAMBIA1304表達(dá)載體,西番蓮PeHSF1基因編碼區(qū)位于pCAMBIA1304表達(dá)載體的NcoI和SpeI兩限制性內(nèi)切酶位點(diǎn)之間。 [0009] 優(yōu)選地,所述重組載體的原始載體為pYES?2表達(dá)載體,西番蓮PeHSF1基因編碼區(qū)位于pYES?2表達(dá)載體的HinIII和BamHI兩限制性內(nèi)切酶位點(diǎn)之間。 [0010] 本發(fā)明的第四個(gè)方面是提供含有第一個(gè)方面所述西番蓮PeHSF1基因編碼區(qū)的宿主菌。 [0011] 本發(fā)明的第五個(gè)方面是提供含有本發(fā)明第一個(gè)方面所述西番蓮PeHSF1基因編碼區(qū)的表達(dá)盒。 [0012] 本發(fā)明的第六個(gè)方面是提供如本發(fā)明第一個(gè)方面所述的西番蓮PeHSF1基因、或者如本發(fā)明第二個(gè)方面所述的蛋白質(zhì)、或者如本發(fā)明第三個(gè)方面所述的重組載體、或者本發(fā)明第四個(gè)方面所述的宿主菌、或者本發(fā)明第五個(gè)方面所述的表達(dá)盒在降低酵母抗旱性和/或抗鹽性中的應(yīng)用。 [0013] 本發(fā)明的第七個(gè)方面是提供如本發(fā)明第一個(gè)方面所述的西番蓮PeHSF1基因、或者如本發(fā)明第二個(gè)方面所述的蛋白質(zhì)、或者如本發(fā)明第三個(gè)方面所述的重組載體、或者本發(fā)明第四個(gè)方面所述的宿主菌、或者本發(fā)明第五個(gè)方面所述的表達(dá)盒在使植物生長(zhǎng)緩慢中的應(yīng)用。 [0014] 在本發(fā)明一個(gè)具體的實(shí)施方式中,所述植物為擬南芥。 [0015] 本發(fā)明的第八個(gè)方面是提供如本發(fā)明第一個(gè)方面所述的西番蓮PeHSF1基因、或者如本發(fā)明第二個(gè)方面所述的蛋白質(zhì)、或者如本發(fā)明第三個(gè)方面所述的重組載體、或者本發(fā)明第四個(gè)方面所述的宿主菌、或者本發(fā)明第五個(gè)方面所述的表達(dá)盒在降低植物抗旱性和/或抗鹽性中的應(yīng)用。 [0016] 在本發(fā)明一個(gè)具體的實(shí)施方式中,所述植物為擬南芥。 [0017] 本發(fā)明的第九個(gè)方面是提供如本發(fā)明第一個(gè)方面所述的西番蓮PeHSF1基因、或者如本發(fā)明第二個(gè)方面所述的蛋白質(zhì)、或者如本發(fā)明第三個(gè)方面所述的重組載體、或者本發(fā)明第四個(gè)方面所述的宿主菌、或者本發(fā)明第五個(gè)方面所述的表達(dá)盒在干旱脅迫和/或高鹽脅迫下降低植物發(fā)芽率中的應(yīng)用。 [0018] 在本發(fā)明一個(gè)具體的實(shí)施方式中,所述植物為擬南芥。 [0019] 本發(fā) 明的 第 十個(gè) 方面 是提 供一 種引 物對(duì) ,所 述 引物 對(duì)為 F’: ATGAACCCCGAAGACAATAAG和R’: TTATATATTCTTGGACGAAT;或者所述引物對(duì)為F’: CCATGGATGAACCCCGAAGACAATAAG和R’:ACTAGTTATATTCTTGGACGAAT;或者所述引物對(duì)為F’: AAGCTTATGAACCCCGAAGACAATAAG和R’:GGATCCTATATTCTTGGACGAAT。

權(quán)利要求

1.一種西番蓮PeHSF1基因,其特征在于,其核苷酸序列如SEQ?ID?NO:1所示。
2.如權(quán)利要求1所述西番蓮PeHSF1基因編碼的蛋白質(zhì)。
3.含有權(quán)利要求1所述西番蓮PeHSF1基因編碼區(qū)的重組載體或宿主菌或表達(dá)盒。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的重組載體,其特征在于,所述重組載體的原始載體為pCAMBIA1304表達(dá)載體,西番蓮PeHSF1基因編碼區(qū)位于pCAMBIA1304表達(dá)載體的NcoI和SpeI兩限制性內(nèi)切酶位點(diǎn)之間。
5.如權(quán)利要求3所述的重組載體,其特征在于,所述重組載體的原始載體為pYES?2表達(dá)載體,西番蓮PeHSF1基因編碼區(qū)位于pYES?2表達(dá)載體的HinIII和BamHI兩限制性內(nèi)切酶位點(diǎn)之間。
6.如權(quán)利要求1所述的西番蓮PeHSF1基因、或者如權(quán)利要求2所述的蛋白質(zhì)、或者如權(quán)利要求3所述的重組載體或宿主菌或表達(dá)盒在降低酵母抗旱性和/或抗鹽性中的應(yīng)用。
7.如權(quán)利要求1所述的西番蓮PeHSF1基因、或者如權(quán)利要求2所述的蛋白質(zhì)、或者如權(quán)利要求3所述的重組載體或宿主菌或表達(dá)盒在使植物生長(zhǎng)緩慢中的應(yīng)用,所述的植物是擬南芥。
8.如權(quán)利要求1所述的西番蓮PeHSF1基因、或者如權(quán)利要求2所述的蛋白質(zhì)、或者如權(quán)利要求3所述的重組載體或宿主菌或表達(dá)盒在降低植物抗旱性和/或抗鹽性中的應(yīng)用,所述的植物是擬南芥。
9.如權(quán)利要求1所述的西番蓮PeHSF1基因、或者如權(quán)利要求2所述的蛋白質(zhì)、或者如權(quán)利要求3所述的重組載體或宿主菌或表達(dá)盒在干旱脅迫和/或高鹽脅迫下降低植物發(fā)芽率中的應(yīng)用,所述的植物是擬南芥。
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